Хромогенне середовище для сечі

Представляємо Вашій увазі хромогенне середовище для сечі від відомого виробника в галузі готові поживні середовища - Biolife Italiana S.r.l..

Принцип методу і пояснення процедури

За останні 25 років хромогенні поживні середовища знайшли широке застосування в діагностичній клінічній мікробіології. У 1997 році компанія Biolife запропонувала хромогенне та флуорогенне середовище для діагностики інфекцій сечовивідних шляхів під назвою ХРОМОГЕННЕ СЕРЕДОВИЩЕ ДЛЯ СЕЧІ, в якому бактеріальне диференціювання було отримано шляхом виявлення β- глюкуронідази, β-глюкозидази та β-ксилозидази.

Це перше середовище піддавалося поступовим поліпшенням протягом багатьох років, і були розроблені нові покоління середовищ. Останнє з них, яке було запропоновано Biolife для Бактеріологія сечі - це ХРОМОГЕННЕ СЕРЕДОВИЩЕ ДЛЯ СЕЧІ, діагностичне середовище, призначене для виділення, підрахунку і передбачуваної швидкої ідентифікації патогенів сечовивідних шляхів, таких як E.coli, Enterobacter-Klebsiella-Serratia, Proteus-Morganella-Providencia, Enterococci, Staphylococci, дріжджі.

Диференціація між мікробними видами або родами досягається через:

• Хромогенний субстрат для β-галактозидази (GAL), який розщеплюється E.coli з виділенням нерозчинного рожево-червоного хромофору.
• Хромогенне похідне глюкопіранозиду для β-глюкозидази (GLU), яке розщеплюється Enterococci з утворенням нерозчинного синьо-зеленого барвника.
• Триптофан для виявлення триптофандезамінази (ТДА) і для проведення швидкого проби на індол.

Бактерії, що продукують обидва ферменти (GAL і GLU), такі як група Klebsiella/Enterobacter / Serratia (KES), дають темно-сині або фіолетові колонії.

Триптофан присутній в середовищі для виявлення членів групи Proteus, які генерують дифузне коричневе забарвлення в результаті активності триптофан-дезамінази. E.coli може бути підтверджена точковою пробою на індол шляхом додавання краплі реагенту Ковача до ізольованих колоній.

Основними характеристиками і перевагами CUA IV є: дуже хороша продуктивність, отримана з добірними і стандартизованими пептонами, оптимізована концентрація агару для інгібування скупчення Proteus spp., посилена візуальна диференціація колоній за рахунок сильних хроматичних реакцій, сірого непрозорого контрастного фону і специфічних ферментативних реакцій для передбачуваної ідентифікації як грампозитивних, так і грамнегативних патогенів.

Вказівки з приготування середовища

Суспендуйте 49,4 г в 1000 мл холодної очищеної води. Нагрійте до кипіння при частому перемішуванні і стерилізуйте в автоклаві при температурі 121 °C протягом 15 хвилин.

Підготовлені планшети повинні бути використані протягом десяти днів з дня приготування. Для тривалого зберігання в попередньо налиті планшети додають кінську сироватку: охолоджують автоклавне середовище до 47-50 °С і додають в асептичних умовах 20 мл/л кінської сироватки. Добре перемішайте і розподіліть по стерильним чашках Петрі.

Фізичні характеристики

• Зовнішній вигляд зневодненого середовища сірий, дрібний, однорідний, сипучий порошок
• Вигляд розчину і підготовлених планшетів сіруваті, непрозорі
• Кінцевий рН при 20-25 °C 7.2 ± 0.2

Потрібні матеріали, але такі, що не надаються

Автоклав, водяна баня, стерильні петлі і тампони, інкубатор і лабораторне обладнання в міру необхідності, чашки Петрі, колби Ерленмейєра, допоміжні поживні середовища та реагенти для ідентифікації колоній, кінська сироватка.

Зразки

Хромогенне середовище для сечі (CUA IV) призначене для мікробіологічної обробки клінічних зразків, таких як сеча. По можливості, збирайте зразки перед антимікробною терапією. Слід застосовувати належну лабораторну практику збору, транспортування та зберігання клінічних зразків.

Процедура тестування

Дайте планшетам нагрітися до кімнатної температури і висушіть поверхню середовища. Обережно перемішайте сечу, щоб уникнути утворення піни.

Опустіть кінець стерильної каліброваної петлі (наприклад, 1 мкл або 10 мкл) в сечу трохи нижче поверхні і видаліть вертикально, намагаючись не переносити її на стойку.

Використовуйте це для інокуляції планшета з CUA IV зверху вниз по вертикальній лінії і знову зверху вниз перпендикулярно цій лінії взад-вперед. Інокулят сечі розподіляють по всій поверхні агару, щоб спростити підрахунок колоній після зростання. Інкубують при температурі 35-37 °С на повітрі протягом 24-48 годин.

Хоча більшість патогенів сечовивідних шляхів легко ростуть, повільно зростаючі патогени і ті, які інгібуються присутністю антимікробних препаратів в зразку пацієнта, можуть не з'являтися після нічної інкубації (16 год).

Виконайте тести на лейкоцитарну естеразу і нітрит, щоб визначити, які культури інкубуються протягом повних 48 годин. Культури сечі, які є негативними після нічної інкубації, але мали один або обидва позитивних ферментних тести, повинні бути інкубовані протягом додаткового дня або повторно інокульовані на планшет кров'яного агару.